2、光質

光質對愈傷組織誘導，有明顯的影響，如百合珠芽在紅光下培養，8周後，分化出愈傷組織。但在藍光下培養，幾周後才出現愈傷組織，而唐菖蒲子球塊接種15天後，在藍光下培養首先出現芽，形成的幼苗生長旺盛，而白光下幼苗纖細。

3、光周期

培養時要選用一定的光暗周期來進行培養，比較常用的周期是16h的光照，8h的黑暗。研究表明，對短日照敏感的品種，在短日照下易分化，而在長日照下產生愈傷組織，有時需要暗培養，尤其是一些植物的愈傷組織在暗培養下比在光下更好。如紅花、烏飯樹的愈傷組織。

三、濕度

濕度的影響包括環境的濕度條件，容器內主要受培養基水分含量和封口材料的影響。前者又受瓊脂含量的影響。在冬季應當適當減少瓊脂用量，否則，將使培養基幹硬，以致不利於外植體接觸或插進培養基，導致生長受阻。封口材料直接影響容器內濕度情況，但封閉性較高的封口材料易引起透氣性受阻，也會導致植物生長受影響。

環境的相對濕度可以影響培養基的水分蒸發，一般要求70%-80%的相對濕度，常用加濕器或經常灑水的方法來調節濕度。濕度過低會使培養基喪失大量水分，導致培養基各種成分濃度的改變和滲透壓的升高，進而影響組織培養的正常進行。濕度過高時，易引起棉塞長黴，造成汙染。

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